头孢吡肟修饰的磁性纳米颗粒和酶比色法检测生菜中的单增李斯特菌

  单增李斯特菌是引起食源性疾病的重要病原菌之一。它广泛存在于自然界中，食品中存在的单增李斯特氏菌对人类的安全具有危险，该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖，是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一，因此，检测食品中的单增李斯特菌是十分重要的。

  什么是单增李斯特菌？

  单核细胞增多性李斯特菌是一种兼性厌氧病原菌，具有较强的生长适应性。最适生长温度为30～37℃，但单核细胞增多性李斯特菌在4℃时仍能缓慢生长繁殖。即使是冰箱里保鲜的食物，如蔬菜、果汁和鲜肉，也有被污染的风险。单核细胞增多症主要影响老年人、孕妇、新生儿和免疫力较弱的人，死亡率很高(约20%至50%)。人类感染单核细胞增多性李斯特菌可导致严重的全身感染，症状包括败血症、脑膜炎和流产。因此，建立一种快速、灵敏、准确的单核细胞增多性李斯特菌筛选方法，对减少感染、保证食品安全具有重要意义。

  怎么检测单增李斯特菌？

  基于培养或聚合酶链式反应(PCR)的常规分析方法是检测食源性病原体最广泛使用的方法，具有良好的准确性，但需要耗时的预富集过程才能获得高检测灵敏度。此外，食品样品中的复杂基质也会干扰细菌的检测。因此，为了实现食源性病原体的快速筛查并在初期控制感染，开发快速细菌分离富集方法显得尤为重要。

  在本文中，本文首次提出了一种基于头孢吡肟功能化MNPs (Cefe-PEG-MNPs)的抗生素磁分离策略，并采用双功能化AuNPs-HRP/ mAb探针夹心法实现了特异性比色检测。通过一系列的表征验证了头孢吡肟在MNPs上的修饰和检测探针的成功合成。在最佳实验条件下，即使在高浓度的单增李斯特菌(106 CFU/mL)下，Cefe-PEG-MNPs仍能在40 min内分离生菜样品中73.8%的单增李斯特菌，样品中非靶菌的存在对单增李斯特菌的捕获影响不大。此外，结合特异性检测探针，成功建立了在纯培养物和加标食品样品中检测单核细胞增多乳杆菌的夹心法，LOD分别为3.1 × 101 CFU/mL和3.1 × 102 CFU/mL。

  图 1 检测原理图

  结论：结果表明，基于抗生素亲和策略的捕获探针(Cefe-PEG-MNPs)具有良好的细菌捕获能力，而双功能化检测探针(AuNPs-HRP/mAb)具有良好的特异性和信号扩增能力，所建立的夹心试验具有理想的灵敏度和准确性。

  参考文献：Xiao F, Wang Z, Li W, Qi W, Bai X, Xu H. Cefepime-modified magnetic nanoparticles and enzymatic colorimetry for the detection of Listeria monocytogenes in lettuces. Food Chem. 2023 May 30;409:135296. doi: 10.1016/j.foodchem.2022.135296. Epub 2022 Dec 23. PMID: 36586253.