基于Cluster 2.1的鸭坦布苏病毒灭活疫苗实现完全临床保护并诱导交叉基因型免疫应答

鸭坦布苏病毒"亚洲鸭业"威胁加剧——Cluster 2.1地域流行与疫苗空白

鸭坦布苏病毒（DTMUV）是一种新发的禽类致病性黄病毒，主要引起鸭子严重神经系统疾病和急性产蛋下降综合征，对亚洲水禽养殖业造成重大经济损失。遗传学分析将DTMUV划分为三个 distinct 基因群：Cluster 1、Cluster 2（含亚群2.1和2.2）以及Cluster 3，其中亚群2.1目前在泰国等东南亚国家占据主导地位。近期研究揭示，不同基因群之间存在显著的抗原性差异，这可能导致交叉保护受限。尽管中国已基于Cluster 2.2毒株开发了灭活疫苗，但针对在泰国等地区广泛流行的Cluster 2.1毒株的疫苗仍然空白，开发地域特异性的DTMUV疫苗迫在眉睫。

灭活疫苗制备突破：β-丙内酯灭活联合ISA 70VG佐剂的双剂量优化策略

研究团队以泰国流行的Cluster 2.1 DTMUV代表株DK/TH/CU-1（GenBank登录号KR061333）为疫苗种毒，采用β-丙内酯（BPL）在4°C条件下进行24小时化学灭活，确保完全丧失感染性的同时有效保留病毒抗原性与免疫原性。灭活后的病毒抗原与Montanide™ ISA 70VG佐剂按30:70（体积比）比例乳化制备疫苗，每剂疫苗抗原含量相当于10^5.51 TCID₅₀。

为系统评估疫苗效果，120只1日龄DTMUV阴性樱桃谷鸭被随机分为4组：阴性对照组（不免疫不攻毒）、模拟免疫对照组（两剂佐剂+攻毒）、1剂疫苗组（7日龄单剂免疫+攻毒）和2剂疫苗组（7日龄和21日龄各免疫1剂+攻毒）。所有攻毒组鸭只在35日龄时经肌肉注射10⁵ TCID₅₀/0.5ml的同源Cluster 2.1 DTMUV进行攻毒，随后连续观察14天，并系统采集血液、血清、咽肛拭子及靶组织（脑、脾脏、法氏囊）进行病毒学、免疫学和病理学分析。

图1. 实验时间线，展示了疫苗接种计划、病毒挑战时机以及样本采集点

关键发现

1、两剂免疫方案实现100%保护。模拟免疫对照组在攻毒后出现90%发病率（9/10）和70%死亡率（7/10），主要表现为共济失调、不愿行走和瘫痪。

2、虽然1剂和2剂方案在首次免疫后14天均可诱导100%血清阳转，但2剂方案在加强免疫后产生的峰值中和抗体滴度约为1剂方案的16倍。

3、苗免疫主要诱导了病毒特异性的辅助性T细胞（Th）增殖，尤其在2剂组中表现显著；但细胞毒性T淋巴细胞（CTL）在免疫阶段未被显著激活，仅在攻毒后表现出回忆性增殖。

未来展望与应用潜力

该研究存在四方面重要局限：其一，疫苗未能实现无菌免疫，攻毒后疫苗鸭的组织与拭子中仍可检出病毒RNA，提示其在阻断感染传播方面的效果有限，未来需通过接触传播实验进一步验证；其二，灭活疫苗主要诱导中和抗体和Th细胞应答，对CTL的激活较弱，而CTL对于清除靶组织中的持续感染至关重要，这解释了为何病毒未能被完全清除；其三，研究仅在樱桃谷鸭模型中完成，疫苗在自然宿主中的效力、最佳免疫程序、免疫持续期以及在种鸭中的母源抗体传递效果有待田间验证；其四，尽管检测到了针对Cluster 1和Cluster 3的交叉反应性免疫应答，但其能否转化为实际的异源保护效力尚未经体内攻毒实验证实，这是下一步研究的关键方向。

参考来源：Rungprasert K, Areeraksakul P, Tunterak W, et al. Immunogenicity and protective efficacy of an inactivated cluster 2.1 duck Tembusu virus vaccine in ducks: Evidence of cross-genotype immune responses[J]. Vaccine, 2026, 88: 128867. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2026.128867.