突破传统狂犬疫苗短板！LVRNA001 经犬、小鼠、食蟹猴、大鼠完整临床前验证

研究背景

狂犬病是由狂犬病毒引发的致命人兽共患病，全球每年约 6 万人死于该病，40% 死亡病例为 14 岁以下儿童，犬类是人感染狂犬病最主要传染源，疫苗接种是唯一可靠防控手段。目前兽医与人用主流疫苗包含灭活疫苗、减毒活疫苗、重组亚单位疫苗，但均存在明显局限：灭活疫苗需多针次接种才能达到有效免疫，在非洲、亚洲欠发达地区造成沉重经济负担；减毒疫苗存在毒株毒力回复风险；痘病毒载体重组疫苗保护效力有限，行业亟需一款接种针次更少、免疫持久、生产便捷的新型狂犬病疫苗。

mRNA 疫苗作为新一代快速疫苗技术平台，无需培养活病毒、体外转录可规模化量产，不会整合宿主基因组，同时能同步激活体液与细胞免疫，在新冠疫苗中已验证技术可行性。此前多款狂犬 mRNA 疫苗在小鼠中展现保护效果，但缺少非人灵长类系统安全性、免疫原性数据，且尚无产品实现商业化。本研究团队前期已证实 LVRNA001 可在小鼠、犬诱导强效免疫，本次进一步补充犬完整攻毒保护数据、小鼠跨毒株防护、食蟹猴长期重复给药毒性、大鼠生殖发育毒性，完成多物种全维度临床前评价，填补国内 mRNA 狂犬疫苗非人灵长类系统性评估空白。

研究结果

犬体内攻毒效力：暴露前、暴露后两针 100% 存活，抗体水平优于传统灭活疫苗

研究采用比格犬模型分别开展暴露前、暴露后预防试验。暴露前方案中，LVRNA001 低剂量 10μg、高剂量 50μg 仅接种 2 针（D0/D7），传统灭活疫苗需 3 针（D0/D7/D21）；所有犬在第 35 天攻毒 50 倍致死剂量街毒 BD06 株，随访 125 天，mRNA 疫苗组与灭活疫苗组存活率均为 100%，空白 PBS 组全部死亡。全程采血检测中和抗体，LVRNA001 组抗体上升更快、125 天长期抗体滴度显著高于灭活疫苗，持续稳定高于 WHO 规定 0.5 IU/mL 保护阈值。

暴露后模拟动物咬伤急救场景：犬感染致死病毒 6 小时后启动接种，LVRNA001 依旧采用 2 针方案（D0/D7），灭活疫苗采用标准 5 针 Essen 程序（D0/3/7/14/28），90 天随访结果显示，两类疫苗全部实现 100% 存活，mRNA 疫苗 90 天时中和抗体水平显著高于五针灭活疫苗，证明更少针次即可实现同等甚至更优急救保护效果。

图1 LVRNA001在暴露前后治疗中为感染RABV的犬只提供了完全保护

小鼠模型：最优免疫程序确认，覆盖国内全部 7 大狂犬病毒分支

小鼠免疫程序对比显示，单针免疫抗体水平最低，D0/D14 两针间隔方案诱导中和抗体显著优于 D0/D7，且仅两针 mRNA 疫苗产生的抗体峰值远超五针灭活疫苗，免疫应答启动速度更快，接种第 5 天即可产生高于两针灭活疫苗的中和抗体。

跨毒株攻毒试验选用代表中国 I-VII 共 7 个进化分支的流行街毒，同时开展暴露前、暴露后保护验证。未接种疫苗小鼠平均存活率仅 10%；暴露前预防中，高低剂量 LVRNA001 全部实现 100% 存活；暴露后急救场景，5μg 高剂量 D0/D14 方案存活率达 88.57%，远高于五针灭活疫苗最高 52.86% 的保护率，证明 LVRNA001 对国内全部流行狂犬毒株具备广谱防护能力。

图2 LVRNA001在暴露前和暴露后小鼠模型中提供了对多种RABV菌株的保护

食蟹猴重复给药慢性毒性：无脏器损伤，仅一过性轻微注射部位炎症

以符合 ICH 生物制品毒理标准的食蟹猴为非人灵长类模型，分为生理盐水、空白 LNP、50μg 低剂量 LVRNA001、150μg 高剂量 LVRNA001 四组，5 周内 4 次肌肉注射，后续 4 周恢复期持续监测 9 周。全程监测体重、体温，肝功能 AST/ALT/ALP 无异常；仅 LNP 相关组出现短暂纤维蛋白原、CRP 炎症指标升高、白球比下降，恢复期 4 周后全部恢复正常，属于脂质载体引发的一过性局部炎症反应。

流式检测外周血 T、B 淋巴细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+、CD20+）全程无显著波动；对脑、心、肝、肾、注射肌肉等 54 种组织病理切片分析，仅接种 39 天时注射肌肉存在轻微炎症，64 天恢复期炎症完全消退，其余脏器无任何疫苗相关病理性损伤，证实 LVRNA001 在灵长类体内无全身脏器毒性。

同时食蟹猴免疫原性数据优异：第 35 天中和抗体最高超 20000 IU/mL，持续稳定至第 64 天；ELISpot 证实疫苗诱导大量 IFN-γ 分泌细胞，产生偏向 Th1 型细胞免疫，利于清除中枢神经系统潜伏狂犬病毒。

大鼠生殖发育毒性：不影响生育、胎鼠与子代生长

为评估备孕、孕期、哺乳期接种安全性，开展大鼠胚胎 - 胎儿发育、产仔哺育双阶段生殖毒性试验。雄性大鼠交配前 4 次免疫；雌性大鼠交配前、孕期、产后 7 天分别接种不同剂量 LVRNA001。剖检统计受孕数量、子宫胎盘重量、活胎数、死胎率，各组与生理盐水对照组无统计学差异；自然分娩后监测出生指数、哺育指数，各组子代存活、生长情况完全一致，无流产、畸形、幼鼠发育迟缓现象，证明该 mRNA 疫苗对生殖、胚胎及哺乳期后代无发育毒性。

小鼠急性毒性验证

单次注射 10μg、50μg LVRNA001 至小鼠后腿肌肉，连续 14 天观察体重、临床体征，高低剂量组小鼠体重增长与生理盐水组无差异，无死亡、活动异常、脏器损伤等急性中毒表现，单次给药安全性良好。

总结与展望

本研究完成 LVRNA001 mRNA 狂犬疫苗从效力到安全的完整多物种临床前评价，核心优势清晰：一是接种程序大幅简化，仅 2 针即可完成暴露前预防与咬伤后急救，大幅减少就诊次数、降低医疗成本，适配狂犬病高发的基层、偏远地区；二是广谱防护能力突出，可覆盖国内 7 大流行狂犬病毒分支，解决传统疫苗对部分地方毒株保护不足的问题；三是免疫应答更全面，同时诱导高滴度长效中和抗体与 Th1 细胞免疫，提升中枢神经系统病毒清除能力；四是全维度毒理数据乐观，小鼠单次给药、食蟹猴长期重复给药、大鼠生殖毒性试验均未发现持久、脏器级毒副作用，仅存在 LNP 载体带来的短期轻微局部炎症，安全性风险可控。

对比海外 CV7201、CV7202 等早期狂犬 mRNA 疫苗，LVRNA001 依托国产 CTN 毒株抗原序列与自研 LNP 递送体系，规避早期产品反应原性差、需特殊接种器械等短板，且完整完成非人灵长类毒理评价，为 IND 申报提供充足支撑。后续研究方向将推进人体 Ⅰ 期临床，验证人体免疫原性与人体安全性；同步优化 mRNA 与 LNP 配方，提升制剂热稳定性，降低冷链运输要求；此外可探索犬类兽用疫苗产业化路径，从源头切断犬传人狂犬病传播链条。整体来看，LVRNA001 突破传统狂犬疫苗的接种频次、保护广度局限，有望成为下一代狂犬病预防的核心候选疫苗，为全球狂犬病消除计划提供全新技术工具。

来源：Safety and efficacy assessment of an mRNA rabies vaccine in dogs, rodents, and cynomolgus macaques. DOI： 10.1038/s41541-024-00925-w.