猫的核心免疫要打四种，能不能合成一针？

给猫打疫苗，是养宠家庭再熟悉不过的事。但很少有人注意到，猫杯状病毒（FCV）、猫疱疹病毒1型（FHV-1）和狂犬病毒（RABV）这三种核心免疫对象，目前基本依赖不同的疫苗产品分别完成。

FCV属于杯状病毒科水疱疹病毒属，感染后常表现为口腔溃疡、齿龈口炎、流涎、咳嗽和结膜炎，幼猫尤其危险，重症可发展为致死性肺炎。更棘手的是，临床康复的猫仍可能持续排毒，在猫群中不断传播。现有FCV疫苗以弱毒苗和灭活苗为主，但该病毒毒株多样性极高、异源交叉保护有限，流行病学监测显示，当前流行株与疫苗株的VP1基因存在明显遗传差异，针对新变异株的疫苗需求迫切。

FHV-1引起猫传染性鼻气管炎，典型症状为打喷嚏、角结膜炎和浆液性眼鼻分泌物。它会在三叉神经节建立潜伏感染，形成终生带毒状态，并在免疫抑制或应激时重新激活。这意味着单纯清除病毒几乎不可能，控制临床症状与排毒成为现实目标。

至于狂犬病，病死率接近100%。我国病例虽以犬咬伤为主，但猫源病例同样存在，而现实中猫的狂犬病免疫覆盖率往往不如犬受重视。

WSAVA 2024版犬猫免疫指南明确将FCV、FPV、FHV-1和RABV列为宠物猫的核心免疫对象，这直接指向一个临床需求：能否用一个载体、一次接种，同时覆盖多种病原？

研究者把目光投向了RABV载体。RABV可大规模体外培养、外源蛋白表达效率高，已被广泛用于新冠、马尔堡病毒、裂谷热病毒和 HIV 等疫苗的载体研究。基于此，本研究以疫苗株衍生的rHEP-Flury为骨架，将FCV的VP1基因插入N-P基因之间，将FHV-1的gB或gD基因分别插入G-L基因之间，构建出 rHEP-VP1-gB与rHEP-VP1-gD两株重组病毒，制成灭活三联疫苗，并系统评价其安全性、免疫原性与攻毒保护效力。

DFA检测可见特异性绿色荧光灶，RT-PCR成功扩增出插入基因；Western blot与IFA共同证实，rHEP-VP1-gB感染细胞中表达VP1和gB蛋白，rHEP-VP1-gD感染细胞中表达VP1和gD蛋白。

对第5代和第10代病毒进行PCR及Sanger测序，连续传10代后插入基因仍保持完整、未检出突变。生长曲线方面，两株重组病毒在120 h达到峰值滴度，比亲本株（96 h）有所延迟，但峰值滴度与亲本株相当。这对疫苗生产是有利属性。

6周龄KM小鼠脑内接种：CVS-11组第6天开始死亡、第8天全部死亡；而两株重组病毒和rHEP-Flury组小鼠在25天观察期内全部存活，仅出现一过性体重下降后恢复。脑组织病理显示仅有轻度神经元变性，致病性与疫苗株相当。

三次免疫（间隔2周）后，VP1特异性IgG在第21天即明显高于cutoff，gB、gD特异性IgG在35 天明显升高。第35天可检出FCV中和抗体，多数血清滴度>1:8，部分>1:16；FHV-1中和抗体滴度为1:2～1:4。RABV中和抗体全部超过WHO推荐的0.5 IU/mL保护水平，且与rHEP-Flury组无显著差异。CVS-11肌肉攻毒后，对照组死亡率60%，免疫组无一死亡且无明显临床症状。

24只8～10周龄中华田园猫经皮下三次免疫后，体温维持正常、体重持续增长。FCV中和抗体在二免后部分个体可检出、三免后显著升高；FHV-1中和抗体直至三免后才被检出；RABV中和抗体在首免后7天即有个体达到0.5 IU/mL，加强免疫后显著提升。

FHV-1攻毒后，疫苗组虽有猫体温超过39.5℃ 但均未达40℃，而rHEP-Flury 组和对照组出现超过40 ℃的个体及死亡病例，疫苗组无死亡，体重下降幅度更小，临床评分显著更低。FCV攻毒结果类似，疫苗组发热更轻、体重恢复更快，对照组出现1例死亡。

病毒载量方面，疫苗组眼鼻拭子FHV-1载量与口鼻拭子FCV载量均显著低于对照组。组织病理显示，对照组肺泡出现广泛炎性细胞浸润、上皮细胞增生与肺泡壁增厚，气管黏膜及黏膜下层炎性浸润明显；疫苗组仅见灶性、轻度炎性细胞浸润。

虽然重组疫苗并未实现完全阻断临床发病。但研究者指出，现有FCV与FHV-1商品化疫苗同样难以提供灭菌免疫；而且中和抗体水平本身并不能完整反映保护力。已有研究报道，中和抗体低于1:4甚至无法检出的猫，攻毒后仍表现出部分保护，提示免疫记忆与细胞免疫同样参与其中。

作者也坦诚列出了局限：未解析gB、gD和VP1在载体中的分子构象；每组猫数量偏少，统计分析属探索性质，需谨慎解读；母源抗体与既往FHV-1暴露无法完全排除；病理取材仅限肺与气管，缺少鼻甲、结膜等上呼吸道组织。

即便如此，这项工作的意义是清晰的： RABV载体平台可以在同一个构建体中同时递呈三种病原的抗原，并在猫体内验证了可行性。作者据此提出下一步方向，开发覆盖FCV、FPV、FHV-1与 RAB的四联疫苗。对于免疫程序繁琐、狂犬免疫覆盖不足的猫群防控现状而言，这条技术路线值得持续关注。

参考文献：https://doi.org/10.1080/21505594.2026.2728426