国内E基因型柯萨奇病毒B3灭活疫苗迎新进展，母源抗体可完全保护新生小鼠

近期，中国医学科学院医学生物学研究所的研究团队，成功研发出一款针对我国当前主流流行的E基因型柯萨奇病毒B3灭活候选疫苗，该疫苗诱导产生的母源抗体能对新生小鼠起到100%的致死攻毒保护作用。这项研究已在《Vaccine: X》发表，为长期处于空白的国产CVB3疫苗研发提供了实打实的实验依据。

可能很多人对柯萨奇病毒B3（CVB3）不算熟悉，但它其实是一种危害不小的肠道病毒。感染后不止会引发心肌炎、胰腺炎、肝炎这类脏器病变，还会参与手足口病的发病过程。目前为止，全球都没有获批上市的CVB3专用疫苗。国内CVB3的优势毒株常见的D基因型已经被E基因型取代，变成了如今的主流流行毒株。基于这个现状，研究团队专门筛选出了适配国内流行株的候选灭活毒株KM50‑W07，并且通过小鼠模型反复验证了它的免疫原性和实际保护效果。

这次研究的毒株样本全部来自临床分离的4株CVB3病毒，工作人员先对这4株病毒做了三轮空斑纯化后开展全基因组测序、VP1基因测序和系统发育分析，分型结果很清晰：KM50‑W07、KM22‑W05、KM20‑W09这三株都属于现在国内占比最高的E基因型，只有KM103‑W06是过去流行的D基因型毒株。

之后团队在Vero细胞上测试了各毒株的增殖能力，其中KM50‑W07的表现格外突出，病毒滴度能达到7.75 log₁₀TCID₅₀/mL，意味着它具备很不错的量产培养潜力。为了确认这个毒株能不能稳定用于疫苗研发，研究人员把它连续传代培养到第15代，全程做全基因组测序监测稳定性。整个传代过程毒株只出现了少量氨基酸突变，病毒滴度也一直保持稳定。综合复制能力、遗传稳定性这两个核心条件，团队最终敲定KM50‑W07作为疫苗候选毒株。

为了后续试验能精准开展，研究团队搭建了一日龄BALB/c乳鼠感染模型，并且确定5.00 log₁₀TCID₅₀作为标准攻毒剂量。从试验结果来看，CVB3对乳鼠的靶向性很明确，主要侵袭肝脏和胰腺组织造成肝细胞水肿、胰腺腺泡细胞坏死，在受损的组织里检测到大量的病毒核酸和病毒抗原。这个模型既能用来对比不同基因型CVB3的致病强弱，也能直观评判疫苗的保护效果。

确定毒株和动物模型后，团队正式开展疫苗制备工作。研究采用甲醛对KM50‑W07毒株进行灭活处理，再经过浓缩、层析纯化等步骤，搭配氢氧化铝佐剂，制成了实验用的CVB3灭活疫苗。研究人员选用7周龄的雌性BALB/c小鼠，设置不同的抗原剂量组别，按照0天、14天、28天的三剂次流程进行腹腔免疫。

免疫后的检测结果能明显看出剂量效应：1 μg和10 μg抗原组的小鼠，完成三免之后，中和抗体几何平均滴度分别达到9.00 log₂、10.58 log₂。后续的交叉中和试验发现：这款疫苗产生的免疫血清，能够有效中和E、D、A多种CVB3基因型毒株，跨基因型保护效果可观。不过它的针对性也较强，对同属B组的CVB1、CVB2、CVB4‑6这些病毒基本没有交叉中和的能力。另外即便毒株传代后出现了少量VP1氨基酸突变，免疫血清依旧可以有效中和不同传代批次的毒株足以证明它的抗原表位足够稳定。

本次研究最核心的亮点，当属母源抗体保护试验。先给雌性小鼠完成全程疫苗免疫，等其产生稳定抗体后进行交配繁育，再对刚出生的一日龄乳鼠施加致死剂量的CVB3多株病毒攻毒。最终试验结果发现所有免疫母鼠生下的乳鼠全部存活，体重增长正常，没有出现任何患病症状，实现了百分百的完全保护。反观对照组的乳鼠，全部出现了明显的发病体征，并且在6天内全部死亡。这也直接证实了这款灭活疫苗诱导产生的母源抗体能够有效帮助新生幼体抵御致死性的CVB3感染。

原文链接：10.1016/j.jvacx.2026.100897