药食同源灰树花，发掘对抗胃癌的天然活性成分

胃癌是全球范围内高发的恶性肿瘤，发病率与死亡率常年位居恶性肿瘤前列，我国更是胃癌高发地区，该病的高致死率给人类健康带来严重威胁。临床中化疗是胃癌治疗的主要手段，但化疗药物在抑制肿瘤细胞的同时，会对正常细胞产生强烈毒性，寻找低毒、高效且能诱导肿瘤细胞凋亡的新型物质，成为胃癌治疗研究的重要方向。发表于《Glycoconjugate Journal》的一项研究，从灰树花中分离得到高纯度多糖 GFP-4，证实其能高效抑制人胃癌 MKN-45 细胞增殖，为胃癌的天然药物研发提供了新的理论支撑与潜在方向。

图1 GFP-4 的分子量、红外光谱及单糖组成分析图谱

研究通过高效凝胶渗透色谱、傅里叶变换红外光谱、离子色谱等多种技术，对 GFP-4 的结构特征进行了系统解析。结果显示，GFP-4 为分子量达 1.09×10⁶ Da 的中性杂多糖，纯度均一且结构明确，由半乳糖、葡萄糖、甘露糖以 1.00:3.45:1.19 的摩尔比组成，分子中含有吡喃糖环，同时存在 α、β 型糖苷键，这些结构特征为其生物活性的发挥奠定了基础（图1）。在体外细胞实验中，GFP-4 展现出显著且稳定的抗胃癌活性。MTT 增殖实验结果表明，GFP-4 对人胃癌 MKN-45 细胞的增殖抑制作用呈明显的浓度依赖性，在设定的浓度范围内，随浓度升高抑制效果显著增强，其中 200μg/mL 浓度作用 24 小时，对细胞的增殖抑制率接近 50%，600μg/mL 浓度的抑制效果与临床常用化疗药物 5 - 氟尿嘧啶相当，展现出良好的肿瘤抑制潜力。

图2 不同浓度 GFP-4 处理 24 h 后 MKN-45 细胞的细胞周期分布图谱

通过 H&E 染色、Hoechst 33342/PI 双染色等形态学观察发现，经 GFP-4 处理后的 MKN-45 细胞，出现了核固缩、染色质凝集、细胞膜通透性增加等典型的细胞凋亡形态改变，且该变化随 GFP-4 浓度升高愈发明显，直观证实了 GFP-4 对胃癌细胞的凋亡诱导作用。为进一步探究 GFP-4 的抗胃癌分子机制，研究开展了细胞周期、凋亡率检测及蛋白表达分析。结果发现，GFP-4 可将 MKN-45 细胞周期阻滞在 G0/G1 期，阻断细胞的正常增殖周期；Annexin V-FITC/PI 双染色结果显示，GFP-4 能显著提升胃癌细胞的早期与晚期凋亡率，且活细胞比例随药物浓度升高大幅下降（图2）。蛋白质印迹实验则明确了其核心作用通路，GFP-4 可显著上调 Fas、FasL、FADD、caspase 8、caspase 3 等凋亡相关蛋白的表达，通过激活 Fas/FasL 介导的死亡受体凋亡通路，启动胱天蛋白酶级联反应，最终特异性诱导胃癌 MKN-45 细胞凋亡。

灰树花作为经典的药食同源真菌，其多糖类成分的抗氧化、免疫调节、抗肿瘤等生物活性已被广泛证实，而研究发现的 GFP-4，更是挖掘出灰树花多糖在胃癌治疗领域的新价值。该研究系统阐明了 GFP-4 对人胃癌 MKN-45 细胞的抑制效果及具体分子机制，证实其是极具开发潜力的胃癌治疗候选物，不仅为灰树花的深度开发与产业化应用提供了科学依据，也为天然多糖类抗肿瘤药物的研发开辟了新路径。

参考文献

Liu C, Ji HY, Wu P, Yu J, Liu AJ. The preparation of a cold-water soluble polysaccharide from Grifola frondosa and its inhibitory effects on MKN-45 cells. Glycoconj J. 2020 Aug;37(4):413-422.