胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）：微生物实验室常用的基础培养基

在微生物实验室里，TSA是一种经常能用到的基础培养基。无论是对生产环境中的微生物进行监测，还是开展常规细菌培养、菌落计数和菌株分离，都可能需要用到它。TSA的英文名称为Tryptic Soy Agar，即胰酪大豆胨琼脂培养基。与针对特定菌种设计的选择性培养基不同，它不含专门用于抑制某类细菌生长的选择性成分，能够为多种好氧菌和兼性厌氧菌提供生长所需的营养。因此，在一些需要先获得菌落、再开展后续鉴别的实验中，TSA常被用作基础培养基，与其他选择性或鉴别培养基配合使用。环凯028074胰酪大豆胨琼脂培养基便属于这类产品，在药品、食品、化妆品微生物检验以及高校教学和科研实验中都有应用。TSA能够适用于多种常见细菌的培养，与其配方有很大关系。按照该类培养基的常见配方，每升含胰酪胨约15g、大豆木瓜蛋白酶消化物约5g、氯化钠约5g、琼脂约15g，最终pH约为7.3（25℃测定）。

胰酪胨和大豆消化物提供细菌生长所需的营养，氯化钠用于维持渗透压，琼脂则让培养基凝固，方便菌落形成和观察。金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等常见细菌，在适宜条件下通常都能在TSA上生长。不过，普通TSA并不能满足所有微生物的培养需求，部分苛养菌还需要添加鲜血或其他特殊营养成分，并配合相应的培养环境。

TSA在药品微生物实验室中应用较多，既可用于适用方法下的细菌计数，也常用于洁净区沉降菌、浮游菌及设备表面的微生物监测，还可以制成接触碟，用于人员手套和设备表面采样。《中国药典》2025年版非无菌产品微生物限度检查法（1105），以及USP 61、EP 2.6.12等国际通则中，均涉及大豆酪蛋白消化物琼脂培养基的应用。食品企业也会使用TSA进行菌株培养、分离纯化和内部微生物监测，检测特定微生物时，还可根据需要配合VRBA、EMB等选择性或鉴别培养基。需要注意的是，GB 4789.2食品菌落总数测定通常使用平板计数琼脂（PCA），不能直接用TSA替代。

在化妆品、饮用水及其他环境样品的微生物检测中，TSA同样可以用于适用方法下的常规培养和菌株分离。对于已经获得的菌株，通过平板划线可以得到分离较好的单菌落，再进行纯培养或后续鉴定。部分适宜在TSA上生长的菌株，还可以根据保存要求制成斜面培养物，用于短期保藏。TSA的配制方法与其他常规琼脂培养基基本相同，使用干粉时，先按照产品说明书规定的用量称取培养基，加入适量纯化水，充分混匀后加热至完全溶解，再进行灭菌。常规灭菌条件为121℃高压蒸汽灭菌15分钟，灭菌完成后，待培养基冷却至适宜温度即可进行倒板。这个过程中，培养基的温度需要控制好。温度太高，倾注法计数时可能影响样品中微生物的存活；温度过低，琼脂又容易提前凝固，导致平板不平整，甚至出现结块。一般可将培养基冷却至45～50℃左右后再进行倾注，具体温度和操作要求应以产品说明书及所采用的检验方法为准。对于需要计数的样品，可以根据实验要求选择涂布法或倾注法。采用倾注法时，将适量样品匀液加入无菌培养皿，再倒入冷却至适宜温度的培养基，混匀、凝固后按规定条件培养；如果目的是分离纯化菌株，则可以通过平板划线逐渐降低局部菌量，使单个细菌或菌细胞团形成相互分离的菌落。培养温度和时间也要根据菌株特性及检验项目确定。

部分常见细菌在30～36℃培养18～24小时后即可形成可观察的菌落，具体培养条件仍需根据检验标准和菌株特性确定。TSA虽然能够支持多种细菌生长，但不具备特定的选择性或鉴别功能，不能仅凭菌落形态确定菌种，需要时还应结合其他培养基和鉴定方法。

培养基质量直接关系到检验结果，新批次TSA投入使用前，应按照适用标准开展促生长试验。常见的细菌质控菌株包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌等。药典规定的相关促生长试验通常采用不大于100cfu的低菌量接种，部分定量试验以0.5～2.0的菌落回收比作为接受范围，具体判定应以所执行的标准为准。对于白色念珠菌、黑曲霉等真菌，还需根据相应检验要求选择适宜的培养基和质控方法。日常储存时，TSA干粉应放在干燥、阴凉处，注意防潮避光，开封后及时密封，防止吸潮结块。成品平板则应按产品说明书规定的条件保存，使用前检查是否存在污染、干裂或冷凝水过多等情况，以免影响菌落生长和计数。环凯028074胰酪大豆胨琼脂培养基可用于符合其适用范围的常规微生物培养项目，实验人员应根据检验要求做好配制、质控和储存管理，并合理搭配其他培养基，为后续的菌落计数、菌株分离及微生物鉴定提供可靠的培养条件。