删除D250R基因可显著降低非洲猪瘟病毒毒力：I/II型重组株候选疫苗实现跨基因型保护

非洲猪瘟（African swine fever，ASF）是严重危害全球养猪业的重要动物传染病。近年来，ASFV的流行格局进一步复杂化。除长期占主导地位的基因II型毒株外，基因I型以及基因I/II型重组病毒也陆续出现。特别是I/II型重组株具有较强致病性，其出现使现有基于单一基因II型毒株开发的疫苗面临新的保护范围问题。因此，寻找既能有效减毒、又能够覆盖不同流行毒株的疫苗靶点，成为ASF疫苗研究的重要方向。

研究人员将目光集中在D250R基因。D250R编码一种病毒特异性的mRNA去帽酶，可促进宿主mRNA降解，抑制包括干扰素等抗病毒蛋白的表达，从而帮助ASFV逃逸宿主天然免疫。序列分析显示，在来自10种基因型的15株ASFV中，D250R编码蛋白的氨基酸同源性达到93.2%～100%，说明该基因在不同ASFV基因型间具有较高保守性，也为其作为减毒靶点提供了依据。

研究人员分别以我国早期分离的高致病性基因II型SY18株和基因I/II型重组JX23-02株为基础，构建了D250R缺失病毒SY18ΔD250R和JX23-02ΔD250R。动物试验表明，两种病毒的毒力均显著降低。SY18ΔD250R免疫猪在免疫后未出现明显临床症状或死亡；JX23-02ΔD250R免疫猪虽然出现短暂低热，但随后恢复正常，所有动物均存活。

图1 D250R缺失病毒株的构建与鉴定 

进一步的攻毒试验显示，两种缺失株的保护能力存在明显差异。SY18ΔD250R免疫后，在同源高致病性SY18攻毒中有4/5头猪存活，保护率为80%。唯一死亡的猪始终未检测到明显的p54特异性抗体，同时其IFN-γ细胞免疫反应也是组内最低水平。这提示ASFV保护性免疫可能并非由单一免疫指标决定，而需要体液免疫和细胞免疫共同参与。

相比之下，以I/II型重组病毒为骨架构建的JX23-02ΔD250R表现出更广泛的保护能力。该候选株免疫猪不仅能够抵抗亲本JX23-02的攻击，在随后进行的交叉保护试验中，对基因II型HuB20和高致病性SY18毒株同样实现了100%存活。攻毒后，大多数免疫猪能够较快清除血液中的病毒核酸，组织中的病毒载量也明显低于对照组，唾液和粪便中的病毒排放总体处于未检出或较低水平。

图2 免疫-挑战保护实验

这一结果还说明，疫苗毒株的遗传背景可能直接影响其保护范围。SY18ΔD250R虽然能够有效抵抗基因II型病毒，却不能保护动物免受I/II型重组JX23-02攻击，即使经过加强免疫也未能改善；而JX23-02ΔD250R则同时覆盖I/II型重组株和基因II型毒株。因此，在ASFV持续演化、不同基因型共同流行的背景下，仅依据传统基因II型毒株设计疫苗可能难以满足未来防控需求。

研究首次将D250R确定为一个具有重要意义的ASFV毒力相关基因，并证明以I/II型重组病毒为骨架删除该基因后，可以在显著降低病毒毒力的同时保留较强免疫原性。尤其是JX23-02ΔD250R表现出的跨毒株保护能力，为应对当前复杂ASFV流行株提供了新的候选策略。

不过，该研究目前仍属于实验性疫苗阶段。研究者指出，未来还需进一步评价其在妊娠母猪等不同生理阶段动物中的安全性，并开展更长期的遗传稳定性、毒力返强以及环境排毒风险研究。因此，JX23-02ΔD250R虽然显示出较好的应用潜力，但距离实际推广仍需要经过更加系统的安全性和有效性验证。

参考来源：Jia, X., Li, N., Sun, X., Ke, J., Zheng, M., Wang, F., … Zhang, Y. (2026). Hybrid genotype I and II ASFV D250R deletions confer protection against parental and genotype II strains and elicit potent immune response. Emerging Microbes & Infections, 15(1). https://doi.org/10.1080/22221751.2026.2640697.