桦褐孔菌多糖：黑色素瘤侵袭的天然抑制剂

黑色素瘤作为高恶性度肿瘤，其转移特性是导致临床治疗效果不佳的关键原因，寻找安全有效的抗转移天然活性物质成为研究热点。《Molecular Medicine Reports》的一项研究，揭示了从桦褐孔菌液体培养液中分离的多糖（Polysaccharide isolated from the liquid culture broth of Inonotus obliquus，PLIO）可通过调控 AKT/NF-κB 信号通路，显著抑制 B16-F10 小鼠黑色素瘤细胞的侵袭能力，为天然产物开发抗黑色素瘤转移药物提供了重要实验依据。桦褐孔菌作为传统药食同源真菌，在亚洲和俄罗斯民间应用千年，其果实体中的多糖已被证实具有抗肿瘤、抗氧化等活性，但野生桦褐孔菌果实体稀缺昂贵，难以规模化应用。为此，韩国江原国立大学与韩国国家生物资源研究所的研究团队，选择液体培养的桦褐孔菌菌丝体为原料提取多糖，既解决了资源瓶颈，又为工业化生产提供了可行路径。

图1 PLIO 对 B16-F10 细胞活力的影响

研究团队通过一系列体外实验验证了 PLIO 的抗转移活性与作用机制。首先，MTT 实验与流式细胞术结果显示，浓度≤200μg/ml 的 PLIO 对 B16-F10 细胞的活力无显著影响，也未诱导细胞凋亡，证明其在有效作用浓度内具有良好的生物安全性，排除了通过细胞毒性发挥作用的可能（图1）。在核心的迁移与侵袭实验中，研究发现 PLIO 对黑色素瘤细胞的迁移能力无明显抑制，但能浓度依赖性地抑制细胞侵袭：100μg/ml 的 PLIO 可将 B16-F10 细胞的侵袭能力降至对照组的 35%（图2）。进一步的蛋白检测显示，PLIO 能显著下调基质金属蛋白酶 MMP-2、MMP-7、MMP-9 的表达，而这类蛋白酶正是肿瘤细胞降解细胞外基质、实现侵袭转移的关键分子。

图2 PLIO 对 B16-F10 黑色素瘤细胞侵袭能力的影响

为探究其分子机制，研究团队通过蛋白印迹实验证实，PLIO 可显著抑制 NF-κB 从细胞质向细胞核的转位，阻断其转录激活功能；同时能抑制 AKT 与 JNK 的磷酸化过程，而 PI3K/AKT 与 MAPK/JNK 信号通路正是调控 NF-κB 活化及 MMPs 表达的核心通路。这表明 PLIO 通过抑制 AKT/NF-κB 信号通路的激活，下调 MMPs 的表达，最终实现对黑色素瘤细胞侵袭的抑制。

值得注意的是，此前研究多聚焦于桦褐孔菌果实体多糖，而该研究证实液体培养的桦褐孔菌多糖同样具有优异的抗黑色素瘤转移活性，且液体培养法具有产量高、成本低、可规模化的优势，为该多糖的产业化开发奠定了基础。该研究不仅阐明了桦褐孔菌液体培养多糖抗黑色素瘤侵袭的分子机制，也为天然多糖类抗转移药物的研发提供了新靶点与新思路。桦褐孔菌液体培养多糖凭借其天然、低毒、抗转移活性明确的特点，有望成为黑色素瘤转移防治的潜在候选药物，也为药食同源真菌的深度开发与高值化利用开辟了新方向。

参考文献

Lee KR, Lee JS, Lee S, Son YK, Kim GR, Sim YC, Song JE, Ha SJ, Hong EK. Polysaccharide isolated from the liquid culture broth of Inonotus obliquus suppresses invasion of B16-F10 melanoma cells via AKT/NF-κB signaling pathway. Mol Med Rep. 2016 Nov;14(5):4429-4435.